膜疏散与醇沉手艺纯化猴头菇粗多糖的较量
猴头菇(Hericium erinaceus),又称猴头菌、猴头、猴菇、猴蘑,属齿菌科,因其形状类似于猴头而得名,是我国珍贵的药食兼用真菌,有“蘑菇之王”的美誉。猴头菇营养价值很高,具有多种生物活性,如抗溃疡、抗炎症、增强免疫力、抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗氧化、抗朽迈、抗辐射、抗突变、抑菌、保肝、提高机体耐缺氧能力、抗疲劳等作用。多糖具有抗氧化、抗辐射、抗凝血、抗肿瘤、调理免疫力、抗疲劳、降血糖血脂等功效。现在用于疏散多糖的要领主要有醇沉法、离子交流树脂法、凝胶柱层析法、膜疏散法等。其中醇沉法是*古板的疏散纯化要领,但该法获得的多糖得率较低、消耗有机试剂量大、疏散所得多糖活性较低。膜疏散法具有不损害疏散物质生物活性、疏散效率高、能耗低、装备简朴、可一连生产、无污染等优点。
来自浙江工业大学海洋学院的蔡铭、陈思、骆少磊和孙培龙等人*主要接纳醇沉、膜疏散、膜疏散+醇沉等手艺对猴头菇子实体多糖举行疏散。同时,对所得猴头菇粗多糖的疏散纯化效果、结构和主要因素举行比照剖析。讨论差别疏散手艺对猴头菇多糖体外抗氧化活性的影响。以期对猴头菇多糖的疏散纯化手艺举行刷新,并为多糖物质的有用使用提供理论依据。
1、粗多糖理化性子剖析
1.1 提取液因素剖析
猴头菇提取液中多糖的质量浓度及提取率显着高于其他4 种因素。
1.2 粗多糖因素剖析
纳滤所得粗多糖的得率约为醇沉的3 倍,批注醇沉会损失大宗的多糖。粗多糖样品中多糖的质量分数即粗多糖样品的纯度。E-He P的纯度*高,B-He P*低;5 种粗多糖中的卵白质量分数也有差别,B-He P大于D-He P,即经由微滤处置惩罚所得的粗多糖中卵白质量分数比纳滤浓缩要低,说明微滤可以除去部分卵白质;醇沉和膜疏散+醇沉所得粗多糖中糖醛酸质量分数较高,约为膜疏散的3 倍,A-He P、C-He P、E-He P中糖醛酸质量分数划分为15.08%、16.58%、16.48%,说明醇沉处置惩罚获得的粗多糖中含有较多的酸性多糖。膜疏散可以保存提取液中约80%的多糖,而醇沉和膜疏散+醇沉疏散所得的多糖保存率仅为30%左右,即醇沉处置惩罚会让大部分多糖损失。微滤+纳滤+醇沉所得粗多糖的纯度虽然*高,却损失了大部分的多糖,微滤+纳滤可以保存提取液中的较多的多糖,且所得多糖纯度较高。
2、粗多糖结构及形态剖析 2.1 傅里叶变换红外光谱剖析
5 种多糖样品结构基本一致,均具有典范的多糖特征吸收峰。在3370 cm-1周围有较强吸收峰,为糖类O—H的伸缩振动吸收峰;在2932 cm-1周围泛起由C—H伸缩振动引起的吸收峰,包括—CH、—CH2、—CH3的伸缩和弯曲振动;1049 cm-1处泛起的较强吸收峰是糖环中C—O—C伸缩振动吸收峰,这3 个峰是糖类化合物的典范特征吸收峰。吸收峰越强,说明多糖含量越高。猴头菇粗多糖在1646 cm-1周围泛起酰胺I带吸收峰,是卵白质的特征光谱。在889 cm-1处的吸收峰批注猴头菇粗多糖中保存β-构型糖。539 cm-1处吸收峰为吡喃型糖环特征。
2.2 紫外光谱剖析
5 种粗多糖紫外光谱图相似。在260~280 nm波优点有吸收峰,说明粗多糖样品中含有核酸和卵白质。B-He P卵白质含量(260~280 nm波优点吸收峰)高于D-He P,批注通过微滤处置惩罚可以除去部分卵白质。通过醇沉处置惩罚所得3 种粗多糖中卵白质量分数比只经由膜疏散的低。与粗多糖样品中卵白质量分数排序(B-He P>D-He P>C-He P>A-He P>E-He P)效果一致。
2.3 粗多糖的微观形态视察效果
A-He P主要为较大的块状,B-He P、D-He P主要为棒状,C-He P、E-He P主要为片状。效果批注膜疏散与醇沉手艺疏散获得的猴头菇多糖有较大的形貌差别:膜疏散所得多为棒状;醇沉处置惩罚所得为较大块状;膜疏散+醇沉所得为片状。
3、猴头菇粗多糖的体外抗氧化活性剖析
3.1 还原力较量
5 种粗多糖组分还原力均随样品质量浓度上升而升高,且保存一定的剂量-效应关系。D-He P还原力*强,*高可达2.21,略高于B-He P,显着高于醇沉及膜疏散+醇沉所得的3 种多糖;E-He P还原力*弱。
3.2 ·OH扫除率较量
5 种粗多糖组分的·OH扫除能力与样品质量浓度均呈正相关关系。E-He P扫除能力*强,B-He P扫除能力*弱。可是各多糖的·OH扫除能力相差不大。当质量浓度抵达5 mg/mL时,5 种粗多糖的扫除率都可抵达80%以上,对·OH都有较好的扫除能力。
3.3 ABTS阳离子自由基扫除率较量
5 种粗多糖对ABTS阳离子自由基都有很好的扫除能力,且均随着样品质量浓度的升高而增强。通过膜疏散所得粗多糖ABTS阳离子自由基扫除率随样品质量浓度增添而上升,且升高速率比醇沉和膜疏散+醇沉获得的粗多糖快,其中D-He P升速*快,A-He P升速*慢,在2.0 mg/mL时5 种粗多糖扫除率都抵达*大值100%。
3.4 DPPH自由基扫除能力较量
5 种粗多糖对DPPH自由基的扫除率都随着样品质量浓度的升高而升高,且保存一定的剂量-效应关系。其中,D-He P扫除能力*强,当质量浓度抵达1.5 mg/mL时扫除率凌驾50%,*高可抵达64.7%;A-He P扫除能力*弱,扫除率*高为53.6%;各组多糖的扫除能力相差不显着。
微滤+纳滤手艺疏散纯化效果较好,其粗多糖得率为10.08%,纯度为43.01%,提取液中80.34%的多糖获得保存。经傅里叶变换红外光谱剖析,5 种工艺处置惩罚获得的粗多糖样品均具有典范的吡喃型葡聚糖和β-型糖苷键吸收峰。5 种处置惩罚获得的粗多糖样品中均含一定量的卵白质,且B-He P的卵白质量分数高于C-He P,说明微滤处置惩罚可以除去部分卵白而提高多糖的纯度。还原力、·OH、2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐阳离子自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基扫除效果批注,5 种粗多糖样品均具有一定的抗氧化能力,且D-He P的抗氧化能力watechliuhede。 本文《膜疏散与醇沉手艺纯化猴头菇粗多糖的较量》泉源于《食物科学》2019年40卷9期83-90页,作者:蔡铭、陈思、骆少磊、杨 开、孙培龙。DOI:10.7506/spkx1002-6630-20180508-112。